Analisador de Metabolismo em tempo real (Seahorse XFe96)
Analisador de Metabolismo em tempo real (Seahorse XFe96)
Projeto EMU FAPESP n° 2018/08479-7
O aparelho Seahorse XFe96 tem a capacidade de avaliar, em tempo real, diversos parâmetros metabólicos simultaneamente em até 96 amostras de células, tecidos ou outros organismos em cultura. O instrumento mede o pH e as concentrações extracelulares de O2, glicose e lactato para fornecer estimativas do uso da glicose pelas células. O analisador XFe96 possui um avanço significativo comparado às outras metodologias existentes para quantificar e avaliar vias metabólicas celulares.
Aplicações
Mede a taxa de consumo de oxigênio (OCR – oxygen consumption rate) e a taxa de acidificação extracelular (ECAR – extracelular acidifcation rate), indicativos de respiração mitocondrial e glicólise, respectivamente.
Avalia a flexibilidade, dependência e capacidade de combustíveis mitocondriais.
Determina o fenótipo metabólico da população celular em estudo.
Vantagens
Avaliações simultâneas e em tempo real da glicólise e respiração mitocondrial.
Quantificações não invasivas sem a necessidade do uso de corantes ou marcadores adicionais.
Não necessita de substratos radioativos.
Quantificação de consumo de oxigênio com rendimento superior ao encontrado com uso de eletrodos polarográficos.
Versatilidade quanto aos tipos de amostras a serem analisadas: linhagens celulares, células primárias, mitocôndrias isoladas e outros organismos (por exemplo, C. elegans).
Possibilidade de aferições múltiplas para avaliação cinética funcional.
Sem a necessidade de limpeza pré e pós análise.
Possibilidade do uso de até 4 compostos (drogas e/ou substratos) que podem ser adicionados automaticamente a cada poço.
Materiais necessários para a realização do ensaio
Placas, cartuchos (cartridges), calibrador Seahorse, meios de cultura Seahorse, reagentes Seahorse.
Exemplos de análises obtidas pelo aparelho Seahorse XFe96.
O aparelho está localizado no prédio IV do Instituto de Ciências Biomédicas – Av. Prof. Lineu Prestes, 1730, Cidade Universitária, Butantã, São Paulo, São Paulo – CEP: 05508-900.