Professores Responsáveis:
Prof. Dr. Diego Luis Costa (dlcosta@usp.br)
Prof. Dr. Lenadro Pires Araújo (leandroaraujo@icb.usp.br)
Técnica Responsável pelos Citômetros: Eliane Aparecida Gomes de Mello Nascimento (facs@icb.usp.br)
Técnica Responsável pelo Analisador Hematológico: Eliane Aparecida Gomes de Mello Nascimento (facs@icb.usp.br)
Citometria de fluxo é uma tecnologia capaz de analisar simultaneamente diversos parâmetros de células ou partículas em suspensão. Seu princípio está na incidência de uma fonte de luz laser que intercepta cada partícula. A dispersão da luz fornece dados relativos ao tamanho e à granularidade da partícula. Moléculas ou estruturas de interesse podem ser estudadas por marcação com fluorocromos ou anticorpos monoclonais acoplados a fluorocromos.
A combinação de diferentes marcadores possibilita uma análise multiparamétrica rica que vem sendo aplicada nas mais diversas áreas de conhecimento.
O Serviço de Citometria de Fluxo do Departamento de Imunologia dispõe de cinco citômetros de fluxo, sendo que um deles também realiza sorting (FACSARIA II) e um analisador hematológico para animais (Equipamento utilizado para fazer hemograma de animais e SOMENTE amostras de sangue total com anticoagulante EDTA ou CITRATO podem ser analisadas, as amostras devem estar LIVRES de coágulos):
1. BD FACSCanto II™
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Cortesia Becton & Dickinson
O FACSCanto II é um citômetro de fluxo para aquisição de amostras. Ele possui 3 lasers (488nm, 633nm e 405nm), e pode ler até 8 fluoróforos. O equipamento fica no ICB IV, 1º andar, sala 108.
Canais disponíveis:
2. BD Symphony A5
O FACS Symphony possui 3 lasers (405, 488 e 640nm) e analisa amostras em 19 canais de fluorescência. Consegue ler partículas a partir de 100nm.
Canais compatíveis:
3. Cytek Aurora
Devido à tecnologia espectral do Cytek Aurora, que conta com 5 lasers e 64 detectores, cada fluorocromo é iluminado pelos 5 lasers e as emissões são registradas em cada um dos 64 canais, criando um perfil de emissão de cada fluorocromo e portanto permitindo uma melhor separação de um fluorocromo do outro, mesmo quando os picos de emissão primários são semelhantes. Segundo a literatura, um aparelho com as mesmas configurações já foi utilizado para analisar até 40 fluorocromos concomitantemente.
Canais compatíveis:
4. BD FACS ARIA II™
(Para realização de sorting de células)
O FACSAria II é um citômetro de fluxo com capacidade de sorting desde uma até quatro populações de forma simultânea. O equipamento também pode ser utilizado para aquisição de determinadas populações celulares, com capacidade de detecção de até 9 fluoróforos diferentes. O equipamento fica no ICB IV, 1º andar, sala 101.
Canais disponíveis:
5. Applied Biosystems Attune Nxt (em breve)
Regras de utilização dos citômetros de fluxo
1) É necessária a autorização do docente responsável pelo usuário e do Serviço de Citometria para o cadastro e uso dos citômetros de fluxo. Somente serão cadastrados usuários que tenham sido treinados para uso dos aparelhos.
2) Cada usuário deverá entregar o Termo de Autorização e Responsabilidade preenchido e assinado por ele e pelo respectivo docente responsável. Uma vez entregue o termo, a plataforma de citometria permitirá o cadastro, agendamento e uso do(s) equipamento(s) pelo usuário. A utilização dos equipamentos por pessoas não autorizadas incorrerá em cobrança de multa de R$500,00.
AGENDAMENTO
O agendamento de horários para os citômetros Canto e Aria para usuários já cadastrados é feito através do sistema eletrônico: http://www.icb.usp.br/facs/. O agendamento dos citômetros Symphony e Aurora é feito pela agenda Google, mediante liberação do usuário.
Para usuários novos, é necessário entrar em contato por telefone (F: 3091-7393), ou pelo e-mail: facs@icb.usp.br com a Eliane Gomes, técnica responsável pelos aparelhos.
• Tempo máximo por usuário é de 2 horas diárias;
• Caso necessite de um tempo maior, favor solicitar pelo e-mail: facs@icb.usp.br
• Agendamento não cancelado será considerado como horário utilizado, portanto será cobrado;
Cancelamento do agendamento
• Até 2 horas antes do uso o cancelamento poderá ser realizado pelo e-mail facs@icb.usp.br e o respectivo serviço não será cobrado;
• Caso o usuário não compareça e não forneça uma justificativa adequada, o fato será comunicado ao seu responsável (orientador/supervisor). Se a situação se repetir constantemente, será avaliada a suspensão do usuário e/ou do grupo a que ele pertence.
• O usuário será cobrado normalmente pelo período agendado e não utilizado, conforme decidido pelo Conselho de Departamento;
• Caso o cancelamento seja solicitado com tempo inferior a 2 horas do uso, o valor será cobrado integralmente, mas o horário poderá ser disponibilizado para o próximo usuário mediante aviso;
O USO DOS APARELHOS DEVERÁ OBRIGATORIAMENTE SER AGENDADO NO SISTEMA ON-LINE, mesmo que o equipamento esteja livre. Uso em período noturno ou nos finais de semana também obedecerão à mesma regra. Se algum usuário for flagrado utilizando os citômetros sem prévio agendamento no sistema on-line, seu responsável será avisado e o valor da hora será cobrado em dobro. O login do computador nos permite saber quem usou o equipamento.
Em caso de necessidade de uso dos aparelhos em período agendado por outro grupo, uma lista de espera poderá será feita, mediante contato com o técnico responsável pelo FACS. Essa medida visa tornar o uso dos aparelhos mais racional.
O preenchimento da ficha de controle (mantida ao lado do teclado) é OBRIGATÓRIO, tanto para controle dos usuários e horários utilizados, como para reportar que o equipamento está funcionando corretamente. TODO E QUALQUER PROBLEMA com o equipamento, por menor que pareça, deve ser anotado na ficha. Adicionalmente, um e-mail deverá ser enviado ao Serviço de Citometria, com a descrição detalhada do problema, para que a assistência técnica seja acionada.
PAGAMENTO
Bimestralmente será feito o levantamento dos valores devidos pelos laboratórios. Tais valores serão comunicados via e-mail ao responsável cadastrado. O pagamento do Serviço de Citometria deve ser feito preferencialmente via FUSP.
Enviar os dados abaixo para pedido de emissão de Nota Fiscal de Serviços e boleto:
NOME:
CPF:
ENDEREÇO:
CEP:
PROCESSO: (agência de fomento e número)
Assim que o pagamento for realizado, o usuário deverá enviar um e-mail com cópia do recibo de depósito e os dados de quem pagou (nome, CPF, endereço e processo FAPESP, CNPq ou outra agência de fomento) ao Serviço de Citometria. Somente depois disso a nota será solicitada à FUSP.
Valores praticados pelo serviço:
BD FACS Canto II
- Usuários Imuno R$30,00/hora
- Usuários instituições públicas R$35,00/hora.
- Usuários instituições privadas R$60,00/hora.
BD FACS ARIA II
- Usuários Imuno: R$100,00 a primeira hora de uso. R$60,00 as demais horas.
- Usuários instituições públicas: R$120,00 a primeira hora de uso. R$60,00 as demais horas.
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Usuários instituições privadas: R$200,00 a primeira hora de uso. R$100,00 as demais horas.
BD Symphony A5
- Usuários Imuno R$50,00/hora
- Usuários instituições públicas R$60,00/hora
- Usuários instituições privadas: R$100,00/hora
Cytek Aurora
- Usuários Imuno R$70,00/hora.
- Usuários instituições públicas R$80,00/hora.
- Usuários instituições privadas: R$140,00/hora.
Applied Biosystems Attune Nxt
(em implantação)
Analizador Hematológico BC 2800 Vet – Mindray
Fonte: Mindray
Este equipamento é utilizado para fazer hemograma de animais e SOMENTE amostras de sangue total com anticoagulante EDTA ou CITRATO podem ser analisadas. A amostra deve estar LIVRE de coágulos, portanto, é preciso atenção na hora da coleta. Outros anticoagulantes podem ser utilizados, porém, a Mindray não garante a exatidão de todos os parâmetros nesses casos.
O aparelho fornece os seguintes parâmetros:
RBC = GV – glóbulos vermelhos ou eritrócitos;
HCT = Ht – hematócrito;
HGB = Hb – hemoglobina;
MCV = VCM – volume corpuscular médio (tamanho das células);
MCH = HCM – hemoglobina corpuscular média;
CHCM = MCHC – concentração de hemoglobina corpuscular média (concentração de hemoglobina das hemácias);
RDW-CV = ADVGVC – coeficiente de variação da amplitude de distribuição dos glóbulos vermelhas;
RDW-SV = ADVGSD – desvio padrão da amplitude de distribuição dos glóbulos vermelhos;
PLT – Plaquetas
MPV = VPM – volume plaquetar médio;
WBC = GB – Leucócitos (células brancas);
LYMPH% = %LINF – porcentagem de linfócitos;
Mid# = no med – célula de tamanho média (eosinófilo, basófilo, monócito);
Gran# = no gran. – granulócitos (neutrófilos);
% méd = mid% – porcentagem de células de tamanho médio;
Gran% = %gran – porcentagem de granulócitos;
PDW = ADP – amplitude da distribuição de plaquetas;
PCT = Plaquetócrito.
O equipamento está localizado no ICB IV, 1º andar, sala 101.
REGRAS DE UTILIZAÇÃO DO ANALISADOR HEMATOLÓGICO:
Os usuários interessados em utilizar o equipamento deverão entrar em contato com a técnica Eliane pelo e-mail: facs@icb.usp.br para treinamento e retirada do Termo de Autorização e Responsabilidade que deverá ser preenchido e assinado por ele e pelo respectivo docente responsável.
AGENDAMENTO:
A reserva do equipamento pode ser feita por usuários PREVIAMENTE CADASTRADOS no sistema eletrônico de agendamento do serviço de citometria: http://www.icb.usp.br/facs/ ou pelo e-mail: facs@icb.usp.br
PAGAMENTO:
Bimestralmente será feito o levantamento dos valores devidos pelos laboratórios. Tais valores serão comunicados via e-mail ao responsável cadastrado, com respectivas informações sobre pagamento que deverá ser feito via FUSP.
VALORES
Os valores aplicados são por leitura de cada amostra, sendo R$4,00 por leitura para comunidade ICB e R$8,00 por leitura para comunidade externa. OBS: Para uma amostra analisada mais do que uma vez será cobrada pelo número de passagens registradas no aparelho.
AVISO IMPORTANTE: Os protocolos de marcação e de aquisição são de responsabilidade do usuário.
